1、钙磷测定 血钙、磷受内分泌系统影响较大,调节机理复杂, 灵敏度差,早期佝偻病血中钙、磷改变不明显, 甚至可以正常,只有佝偻病临床表现比较明显时才出现降低，故血钙、磷检测不能准确反映早期骨钙化真实度，对早期佝偻病的诊断意义不大。
2、发钙测定 发钙由于含钙量低,毛发表面吸收阳离子,尚无可靠方法去除外源性钙的干扰,且很难确定发钙的参考值,因此发钙测定钙营养状况是不可靠的;
3、尿钙测定 尿钙由于受尿液酸碱度、饮食钙含量、肠钙吸收饮水量、尿中其他阳离子摄入量、留尿时间等因素影响,单次尿样测定更无价值，因此尿钙测定钙营养状况是不可靠的。
4 、X线检查 以往手腕部X线检查是佝偻病诊断和分期的主要依据,X片可反映患儿骨骼改变程度,能帮助临床对活动性佝偻病进行分期,而它对早期的轻微变化不易识别.它一般仅在佝偻病一定时期才有异常表现，即矿物含量降至30%～40%以下时,X线摄片才能出现异常,此时多属佝偻病后期,对早期诊断意义不大;同时其有一定的放射性,幼儿反复接触X线对生长发育有一定影响,家长不易接受，故诊断早期佝偻病可靠性差。
5、血生化检查 虽然临床上有不少血生化检查有助于佝偻病诊断,但由于灵敏度、特异性及费用等问题,使佝偻病早期诊断受到一定限制。如碱性磷酸酶(AKP)测定，AKP主要是由骨骼、肝、胆、肾、小肠等多种组织器官产生的碱性磷酸酶同工酶组,作为佝偻病诊断虽有较好的价值,但易受体内多种器官所产生的AKP同工酶及夹杂疾病的影响，因此所测结果虽能发现部分早期患儿，但缺乏特异性,敏感度不高。近年来1,25(OH)2D3测定是目前国内外公认的早期诊断价值较高的检测指标, 被认为对佝偻病诊断意义最大，但它不能反映骨钙的修复与否，且需要较复杂的仪器设备及技术操作,费用较高，不便于常规检查, 尚不能在一般医院开展。上述生化检查只能反映人体近期维生素D3的营养水平，不能反映人体长期钙营养状况;且检测时需抽取静脉血、程序复杂、成本高、速度慢、患儿痛苦，家长及患儿不易接受。
6 、BAKP水平测定 从佝偻病的病理生理、病理生化的改变来看,关键是成骨障碍,在成骨过程中要通过骨钙化的主要活性物质-骨源性碱性磷酸酶(BAKP)的催化作用,才能使长骨不断生长。儿童体内缺乏维生素D时，骨钙化不足，成骨细胞活跃，血BAKP活性上升，随着病情加重，BAKP活性不断上升，因而产生骨盐沉积减少，类骨组织增多。由于骨样组织钙化障碍，成骨细胞代偿性增生功能活跃，导致BAKP分泌增多等一系列骨骼症状和生化改变，疾病恢复时，BAKP活性逐渐下降，它直接反映佝偻病的病期。由于 BAKP能真实地反映成骨细胞的活性与体内的钙营养状况及骨钙化程度，只有骨转化障碍时，BAKP才会上升，其改变出现早, 先于X线变化及临床症状和体征，且不易受体内代谢因素影响。有报道,BAKP阳性率明显高于X线阳性率。国内外一致认为血BAKP是反映骨改变全过程、反映骨生长障碍、诊断佝偻病最正确、最敏感、最特异的指标。另外BAKP能指导临床合理用药，避免钙剂和鱼肝油的滥用,减少医源性损害发生;还能迅速反映治疗效果，亦是判断疗效的一种简便可靠的方法，BAKP活性降低，治疗即有效。BAKP测定所用设备简单、快速灵敏,有较好早期诊断能力，能够给临床提供早期诊断依据。测定时取材简单，可与血常规同时取血，无放射性损伤;同时操作简单,费用低,儿童及家长都能接受。
